C18液相色譜柱是常見的一種液相色譜分析柱,其外觀為一根細長的柱體,柱內(nèi)填充有具有親水性、疏水性的特殊材料,能夠?qū)悠愤M行有效分離。被廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域中,具有分離效果好、再生性強等優(yōu)點。但在使用過程中也需要注意一些事項,以保證分析效果的準確性和穩(wěn)定性。
一、原理:
它以載體C18硅膠為基礎(chǔ),表面有著親水作用基團和疏水作用基團,即為有機硅烷烴,它能夠在相反的極性與氫鍵作用下,從復雜的混合物中一步步地將各種成分分離出來,之后用進樣器送進柱中。C18柱堆砌的成品可以很長,為什么這么長?因為其潤濕性較差,需要較長的均相化時間,柱子越長,分子擴散的時間越長越有利。
二、性能優(yōu)點:
1、分離選擇性好:C18柱中的疏水相互作用可有效分離不同化合物。
2、適用范圍廣:適用于許多有機、無機化合物和生物類化合物的分離。
3、再生性強:有適當?shù)乃釅A穩(wěn)定性和保持良好性能的方法,同時具有很好的再生性。
4、使用壽命長:一般可以使用3~6個月,這對于長期實驗的研究有巨大的價值。
三、應(yīng)用:
C18液相色譜柱廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、環(huán)保、化學、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域中。在農(nóng)業(yè)中,被用于分離農(nóng)藥與其他化合物,便于在田間操作中的使用。
在生物領(lǐng)域,可被用于肽、蛋白質(zhì)的純化。例如,它可以用于肽的富集分離和金屬蛋白質(zhì)的純化與鑒定。此外,還可以用于生物質(zhì)量分析(MALDI-MS)中的樣品分離和富集。
在化學領(lǐng)域中,用于有機物、天然化合物、無機物等化學品的分離、純化和檢測,這對于化學發(fā)現(xiàn)和化學工業(yè)有很大的助益。
四、使用注意事項:
1、柱的使用壽命:C18柱的使用壽命一般為3-6個月,使用過久會導致柱子失效,分離效果變差。
2、保持柱子干燥:C18柱屬于親疏作用基團的材料,應(yīng)避免水分和濕氣進入柱中,以免降低柱子的分離效果。
3、配合良好的移動相:C18柱分離的關(guān)鍵在于移動相的選擇,如果移動相的選擇不當,則會影響柱子的分離效果。因此,應(yīng)采用合適的溶劑體系來保證柱子的分離效果。